ABSTRACT
Os receptores solúveis para eritrócitos de carneiro (E) podem ser encontrados sob forma solúvel em soros humanos, e em níveis elevados em patologias associadas com a imunossupressäo. No presente trabalho, concordando com os dados da literatura observamos nível de receptores solúveis para E (Rs) em níveis elevados em soros de pacientes com hanseníase. A partir desses soros, isolamos Rs de peso moleculares distintos, Rs1 (= 58 KDa) e Rs2 (acima de 150 KDa), por cromatografia por gel filtraçäo (Sephadex G-200) e por troca iônica (DEAE celulose), concordando com os resultados obtidos anteriormente com soros de pacientes urêmicos ou neoplásicos. As fraçöes positivas detectadas, por ensaio imunoenzimático, quando analisadas por eletroforese em gel de poliacrilamida e por "western blotting" utilizando soro anti-Rs, demonstraram apenas uma banda de Rs1 e uma ou duas bandas para Rs2. Para verificar se os mesmos apresentavam alguma relaçäo com CD2, molécula de superfície de linfócito T que interage com E, e com CD58, ligante natural de CD2, foi realizado ensaio imunoenzimático utilizando anticorpos monoclonais respectivos. Os resultados obtidos sugerem a inexistência de relaçäo de Rs1 e Rs2 com a molécula CD2 ou CD58
Subject(s)
Humans , Male , Female , Adult , /chemistry , Erythrocytes/pathology , Leprosy/diagnosis , Antilymphocyte Serum/analysis , Chromatography , Enzyme-Linked Immunosorbent Assay , Immunosuppression TherapyABSTRACT
Neste trabalho foi obtido soro anti-receptor de linfócitos de carneiro (E) por imunizaçäo de carneiro com eritrócitos autólogos sensibilizados com receptores solubilizados de membranas de linfócitos humanos. A análise desse soro anti-receptor solúvel (anti-Rs) demonstrou a capacidade de inibir a formaçäo da rosácea, de identificar linfócitos T por imunofluorescência indireta, de aglutinar complexo E sensibilizado com receptor solúvel, confirmando os dados da literatura. Considerando que esse soro anti-Rs interage com moléculas de peso molecular aproximado de 58 Kd (Rs1) e acima de 150 Kd (Rs2), foi analisado o efeito bloqueador desse soro anti-Rs na interaçäo de Rs1 e Rs2 a E. Adicionalmente IgG anti-Rs foi purificada através de cromatografia de afinidade utilizando coluna de Sepharose Proteína A e analisada em cultura de linfócitos. Essa IgG anti-Rs purificada, nas concentraçöes de 60 e 120 µg induziu resposta proliferativa de linfócitos humanos normais "in vitro"